2112月

常用的重组DNA分子导入原核宿主细胞的方法有几种

使展开整个

经用的重组DNA分子导入原核宿主细胞的办法有几种

次要办法:

〔1〕走失的接受器细胞:

(1)农杆状菌转变。

根癌农杆状菌是壤打中一种缩微跑过。,白痴使适应双子叶走失的和裸子走失的的传染,最出色地的子叶走失的没被传染。农杆状菌进入走失的,Ti质体上的T-DNA将被转变到接受器C的DNA上。,它是进入走失的细胞的靶遗传因子。。

(2)受精管发生:

有钱人靶遗传因子的DNA烈性酒在受精跑过后倾入子房,走失的健康有精神的面貌、受精跑过中受精管发生的整队,外源DNA导入合子母细胞的讨论,齐头并进一步遵从到接受器细胞遗传因子组中。,跟随合子的一茬植株,它们变得新的转遗传因子项目。。这种办法是奇纳河奖学金获得者周光裕在80年代初推荐的。,奇纳河最深受欢迎的转遗传因子抗虫棉是由。这种办法的最大优点是它不依赖于机构CUL。,复杂技术,用不着灵巧使完美的Lab,英国政治工党。,会议育种教育工作者轻易急于接受。。

(3)粒子轰击:

这种办法也称为粒子轰击(粒子)。 轰击),高速公路粒子注射器技术(高速公路) particle 微尾随)或遗传因子枪轰击技术(遗传因子) gun 轰击),这是康奈尔学院生物神秘的变化的一讨论成果。。次要应用于单子叶走失的。。但转变效力较低。。

遗传因子枪按功率分为促进剂爆轰零碎、压服放电和紧缩空谈驱动力的三生型。原始的是金属颗粒(金颗粒或钨GRA)。,DNA在表面上的吸附,以必然的全速射入走失的细胞。,小颗粒的强穿透性,到这地步,用不着去除细胞壁和覆盖和E。,这么到达不变间隔的他觉的。。

〔2〕牲口接受器细胞的引见:
显微注射器法:显微注射器法(microinjection)是使用管尖极细(至μm)的合成树脂做的微量注射器针,外源遗传因子提取在原核阶段胚胎打中直接地注射器,和,重组(重排)能够经过、切断(切断)、重现(duplication)或迁移(translocation)等景象而使外源遗传因子嵌入宿主的染料体内。

〔3〕缩微跑过接受器细胞
才能办法:用Ca水合氢处置细胞。,细胞存在生理情状,吸取SUR打中DNA分子。,这些细胞是能触摸的细胞。,和将重组表达搬运人DNA融化于缓冲溶液中。,在必然发烧下,触摸态细胞吸取DNA分子。

发表评论

电子邮件地址不会被公开。 必填项已用*标注